基因重组干扰素-γ对类风湿关节炎患者体内免疫调节
   曹之舫等（第二军医大学医学生物技术和分子遗传研究所，上海200433）
   孟济明等（第二军医大学附属长海医院内科风湿病专业组，上海200433）
  摘要 用重组基因干扰素γ（γifn-γ）1.0*106u治疗类风湿关节炎（ra）患者并检测多项免疫学指标，结果表明，患者的总t淋巴细胞、t4/t8比值无明显改变，淋巴细胞表达tac抗原和mhcⅱ类抗原的水平亦与治疗前相似；但淋巴细胞转化率由治疗前的异常升高降至正常范围，单核细胞hla-dr表达由68%提高至79%，hla-dp、-dq的表达则增加了一倍以上。研究结果显示γifn-γ对ra有较强的体内免疫调节作用。
   关键词   γifn-γ  ra   t细胞亚群   单核细胞   mhcⅱ类抗原
   体外刺激试验表明干扰素γ能促使mф的肿瘤细胞杀伤效应，增强nk细胞的细胞毒活性以及诱导人外周血单核细胞、腹水中的卵巢癌细胞和骨髓瘤细胞系表达mhcⅱ类抗原，但欲确切的了解ifn-γ对人体免疫系统的调节作用，还有赖于替内实验结果。文献报道用ifn-γ治疗恶性肿瘤和aids后患者一些免疫学指标的变化不尽一致。本文报告用人基因重组干扰素γ（γifn-γ）治疗类风湿性关节炎（ra）前后的t细胞亚群、mhcⅱ类抗原的诱导表达以及淋巴细胞转化率等指标的变化
材料与方法
1.1 试剂
t细胞亚群、tac抗原（il-2受体）以及hla-dr和-dq单抗与fitc标记的二抗均购自卫生部武汉生物制品研究所；淋巴细胞分离液，上海试剂二厂；pha，广州医药公司；rpmi1640，日本日水制药株氏会社出品；实验中所用其他化学试剂均为分析纯。
1.2 rifn-γ
  本所研制，纯度大于95%，比活性2.0*107u/mg，每瓶含量为1.0*106u，溶于1ml注射用水后使用。
1.3  病例及治疗方案
  ra患者24例，男性9例，女性15例，符合ara（1987）诊断标准，病期ⅰ—ⅱ期，患者如院前未用或停用其他抗风湿药物，如院后给予rifn-γ1，0*106u肌肉注射，每周连续用药5d，停2d，共用4w，分子用药前和用药后7d、28d采血测定淋巴细胞转化率、t细胞亚群分类、tac抗原表达以及淋巴细胞和单核细胞hla-dr、-dp和-dq的表达水平。
1.4  细胞准备
     静脉采血，肝素（125u/ml）抗凝，加等量hanks液，混合后用淋巴细胞分离出单个核细胞，用含2%fcs的hanks液（下同）洗2次后重悬于rpmi1640完全培养基中，将细胞悬液加于直径3cm塑料平皿中（美国corning公司产品，预先加3mlfcs,370c2h）,370c温育45min，小心吸取含有未粘附细胞的上清，并用培养基轻轻冲平皿2次，将冲洗液与上清混合，离心、洗细胞2次，此为淋巴细胞悬液；平皿中的黏附细胞用1.0mmol/l edta消化3-5min，收集细胞液，hanks液洗2次后重悬于完全培养基中，此为单核细胞液。台盼蓝拒染试验显示活细胞占98%，形态学观察和非特异性酯酶染色证实92%为单核细胞。调整淋巴细胞和